Recepção: 09-06-2026
Aprovação: 15-07-2026
pág. 3192
DOI: https://doi.org/10.61616/rvdc.v7i2.1734
Evolución, interferencia y aspectos futuros de la
espectrofotometría en la cuantificación de hemoglobina en sangre:
Una revisión sistemática
Alejandro Antonio Baque Pibaque
alejandro.baque@unesum.edu.ec
https://orcid.org/0009-0007-5947-4533
Facultad de Ciencias de la Salud
Universidad Estatal del Sur de Manabí
Jipijapa-Ecuador
Francisco Alexander Pesantes Pincay
francisco.pesantes@unesum.edu.ec
https://orcid.org/0000-0003-4968-0679
Facultad de Ciencias de la Salud
Universidad Estatal del Sur de Manabí
Jipijapa-Ecuador
Silvia Elisa Chóez Cañarte
choezcanartesilviaelisa@gmail.com
https://orcid.org/0009-0003-1156-7002
Facultad de Ciencias de la Salud
Universidad Estatal del Sur de Manabí
Jipijapa-Ecuador
David Antonio Baque Chóez
davidbaque050427@gmail.com
https://orcid.org/0009-0004-4333-3689
Facultad de Ciencias de la Salud
Universidad Estatal del Sur de Manabí
Jipijapa-Ecuador

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RESUMEN
La cuantificación espectrofotométrica de la hemoglobina es fundamental y forma parte de
las pruebas indispensables en la hematología porque ayuda a detectar el diagnóstico de
alteraciones fisiológicas o anemias. No obstante, esto también conlleva a que exista la
presencia de interferencia analíticas que exigen en su evolución técnica una actualización de
sus fundamentos, pero también de sus limitaciones. El objetivo fue analizar la innovación de
la tecnología, los orígenes que interfieren en la preanalítica y los planes de control en la
precisión espectrofotométrica de hemoglobina. Se llevó a cabo una investigación
bibliográfica narrativa y descriptiva se realizó una revisión sistemática cualitativa de acuerdo
a los estándares de la declaración PRISMA. Fueron consultados artículos originales en las
bases de datos PubMed, SciELO, Redalyc y Google Académico. Lo resultados demostraron
un cambio progresivo desde el método manual de cianmetahemoglobina (Drabkin) hasta la
automatización con laurilsulfato de sodio (SLS), que elimina el uso de reactivos tóxicos y
mejora la considerablemente la reproducibilidad (CV < 1.5%). En cuanto a la hemólisis, la
lipemia y la ictericia fueron identificadas como las principales fuentes de desviación por
alteración de absorbancia y dispersión lumínica (scattering). Se concluyó que en el
diagnóstico de la hemoglobina se necesita una estricta verificación en cuanto al grado de
hemólisis, lipemia e ictericia, también como el uso de blanco de muestra de corrección
óptica. En cuanto a las tecnologías no invasivas (NIR) son consideradas la alternativa
prometedora, sin embargo, necesitan de una mayor estandarización en cuanto a los
métodos referenciados.
Palabras claves: Espectrofotometría, hemoglobina, interferencias analíticas, hemólisis,
lipemia
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Este trabajo está bajo una licencia Creative Commons Attribution 4.0 International.

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Evolution, interference, and future aspects of spectrophotometry
in blood hemoglobin quantification: A systematic review
ABSTRACT
Spectrophotometric quantification of hemoglobin is fundamental and constitutes an
essential hematological test, as it aids in diagnosing physiological disorders or anemias.
However, this process is also subject to analytical interferences, necessitating an update
regarding both the underlying principles and the limitations of the technical methods
employed. The objective was to analyze technological innovations, sources of pre-analytical
interference, and quality control strategies for spectrophotometric hemoglobin
measurement. A narrative, descriptive literature review was conducted following PRISMA
statement standards. Original articles were sourced from PubMed, SciELO, Redalyc, and
Google Scholar. Results demonstrated a progressive shift from the manual
cyanmethemoglobin (Drabkin) method to automation using sodium lauryl sulfate (SLS); the
latter eliminates the use of toxic reagents and significantly improves reproducibility (CV <
1.5%). Hemolysis, lipemia, and icterus were identified as the primary sources of
measurement deviation due to altered absorbance and light scattering. It was concluded
that accurate hemoglobin assessment requires strict monitoring of the degree of hemolysis,
lipemia, and icterus, as well as the use of sample blanks for optical correction. Regarding
non-invasive technologies (NIR), while considered a promising alternative, they require
greater standardization against reference methods.
Keywords: Spectrophotometry, hemoglobin, analytical interferences, hemolysis, lipemia
License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International license.

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INTRODUCCIÓN
La hemoglobina, considerada la proteína con más interés científico no solo por su
importancia para evaluar la salud general del ser humano, sino también por sus constantes
descubrimientos, que se vuelven un reto para la medicina contemporánea. (Peñuela, 2005).
La cuantificación precisa de la concentración de hemoglobina sanguínea es de gran valor
clínico, porque ayuda a detectar enfermedades hematológicas, renales y cardiovasculares.
(Aguirre et al., 2026)
Durante la historia y evolución de laboratorio se ha observado avances metodológicos tanto
visuales como colorimétricos que han llegado hasta métodos de alta precisión. Al llegar la
espectrofotometría permitió la cuantificación de la hemoglobina sanguínea que facilita
detectar alteraciones porque su fundamento analítico se basa en la interacción directa de la
luz. (Rosa et al., 2020)
En el laboratorio clínico siempre se ha buscado obtener resultados confiables y precisos que
ayuden al diagnóstico clínico y a la recuperación de la salud. No obstante, existen
interferencias analíticas que no dejan cumplir con esta labor; por ello conocer y comprender
dichas interferencias van a marcar la diferencia en la mejora de resultados lo que va a
garantizar que sean más eficientes. (Marín, y otros, 2024)
En busca de mejoras considerables que ayuden a que las interferencias analíticas no limiten
la calidad de los resultados, se debe promover sistemas que puedan garantizar su eficacia y
la automatización es uno de los pasos agigantados que permitirán disminuir esta brecha.
(Briones, Jiménez, & Farías, 2009) De igual manera, integrar métodos como los de
gravimetría y espectrofotometría han reducido la demora en resultados lo que hace más
exitoso el proceso de evaluación y entrega de resultados garantizados. (Escobar, Arias, &
Mantilla, 2013)

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Queda claro que una de las garantías para mejorar los diagnósticos es conocer la historia,
aplicar métodos espectrofotométricos y detectar interferencias analíticas que muchas veces
no permiten la veracidad de los resultados. Ante esta falencia el objetivo de esta revisión
sistemática es analizar la historia, las interferencias analíticas y los aspectos futuros de la
espectrofotometría en la cuantificación de la hemoglobina sanguínea, aportando de esta
manera evidencia científica para el laboratorio clínico.
METODOLOGÍA
En la presente investigación científica se llevó a cabo una investigación bibliográfica narrativa
y descriptiva se realizó una revisión sistemática de literatura cualitativa con la intención de
analizar la evolución, las interferencias analíticas y los aspectos futuros de la
espectrofotometría en la cuantificación de la hemoglobina. El enfoque de este estudio sigue
las directrices generales para la declaración PRISMA (Preferred Reporting Items for
Systematic Reviews and Meta-Analyses) que avala la rigurosidad del proceso. (Page et al.,
2021) Se emplearon los siguientes criterios de inclusión y exclusión para la respectiva
selección de evidencia.
Criterios de inclusión. Se incluyeron artículos científicos originales, revisiones sistemáticas,
reportes técnicos y meta-análisis publicados en revistas científicas arbitradas por pares.
Publicaciones en idioma español o inglés que contienen explícitamente la
espectrofotometría aplicada en la hemoglobina.
Criterios de exclusión
Documentos de literatura gris sin revisión por pares, informes no arbitrados, artículos sin
acceso a texto completo, estudios ajenos a la espectrofotometría.

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Análisis de datos
La evaluación inicial se realizó mediante la lectura crítica de títulos, resúmenes, búsqueda
exhaustiva de artículos preseleccionados en la base de datos electrónicos PubMed, SciElo,
Redalyc y Google Académico que fueron analizados a texto completo para verificar el
cumplimiento de los criterios metodológicos. Para la construcción de las cadenas de
búsqueda se emplearon Descriptores en Ciencias de la Salud (DeCS) y Medical Subject
Headings (MeSH). Se extrajeron datos estandarizados sobre: autor(es), año de publicación,
diseño del estudio, muestra o matriz analizada, metodología espectrofotométrica aplicada y
principales hallazgos analíticos.
Consideraciones éticas
La presente investigación es de bajo riesgo, y es fundamentada estrictamente en el análisis
de fuentes bibliográficas ya publicadas. Se cumplieron los derechos de autor por medio de
la citación y la referencia con el formato APA. Como este estudio no involucró la interacción
con personas ni utilizó datos personales, no se consideró necesaria la aprobación de un
comité de ética.
RESULTADOS
Una vez realizado el proceso de selección bibliográfica se establecieron los acontecimientos
principales sobre la evolución de la espectrofotometría, las interferencias analíticas, así
como también el desarrollo científico en la medición de la hemoglobina. En la tabla 1
podemos observar lo analizado según evidencias de la información seleccionada.

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Tabla 1
Metodología /
Tecnología
Fundamento Analítico Ventajas Clínicas Limitaciones /
Desafíos
Método de Drabkin Transforma la muestra
mediante reacción
química a
cianmetahemoglobina
estable; cuya intensidad
es medida por
absorbancia a 540 nm.
Constituye un referente
internacional que
requiere una inversión
reactivos.
Utiliza cianuro, un
reactivo de alta
toxicidad que exige
manipulación manual
prolongada y presenta
interferencia por
turbidez.
Espectrofotometría
Automatizada
Integrada
Esta técnica emplea
laurilsulfato de sodio
(SLS) o azida-
metahemoglobina en
flujo continuo para la
lectura colorimétrica
directa.
Procesa grandes
cantidades de muestras
y proporciona alta
reproducibilidad,
además de eliminar
reactivos tóxicos e
integrar parámetros
hematológicos.
Requiere de
calibraciones
constantes y
exigentes, a esto se
añade que atiene
elevados costos de
adquisición y
mantenimiento.
Espectroscopía de
Infrarrojo Cercano (NIR)
Establece una absorción
diferencial de fotones al
atravesar piel y tejidos
en el rango de 600 a
1100 nm
Impide punciones
venosas, y a su vez
permite monitorear de
manera continua y en
tiempo real además
ofrece alta aprobación
en las áreas de pediatría
y cuidados intensivos.
Presenta sensibilidad a
interferencias por
pigmentación
cutánea, perfusión
tisular y movimiento;
requiere mayor
validación clínica.
Espectrometría de
masas (LC-MS/MS)
Realiza separación
cromatográfica y análisis
de masa/carga (m/z)
para identificar variantes
peptídicas.
Ofrece extrema
sensibilidad en la
identificación de
hemoglobinopatías
complejas y
glucosiladas
Elevada complejidad
técnica; resulta
inalcanzable como
prueba de rutina
rápida en la mayoría
de centros de salud.
Como se observa en la tabla 1, se esquematiza la evolución de la espectrofotometría que
comienza desde el método manual de cianmetahemoglobina de Drabkin el cual está
representado y caracterizado por usar reactivos de alta variabilidad manual y tóxicos que

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conlleva bastante tiempo en su proceso (Balbuena & Gomez, 2018), y sigue hacia la
automatización que permite el procesamiento numeroso de muestras con la detección de
laurilsulfato de sodio (SLS) y elimina el uso de cianuro (Osei-Bimpong, McLean, & Lewis,
2019). Por otra parte, la espectrometría de masas (LC-MS/MS) y la espectroscopía de
infrarrojo cercano (NIR) se complementan como una herramienta compleja para la vigilancia
no invasiva en el diagnóstico de las variantes de hemoglobina complicadas a pesar de que,
su desarrollo e implantación en el área de laboratorio clínico puede verse afectado por la
sensibilidad biológica y también por obstáculos de costo (Gómez Bernal & Reyes, 2021).
Tabla 2
Interferencia Analítica Mecanismo
Físico-Químico de
Interferencia
Impacto en el
Resultado
Estrategia de
Mitigación
Recomendada
scattering
Presencia de
hemoglobina libre y
detritos celulares que
afectan la línea base
espectral.
Sobre estimación
imaginaria de los
niveles de
hemoglobina.
Verificación del índice
hemolítico;
estandarización exacta
de la fase preanalítica
de venopunción y
centrifugación.
Lipemia
(quilomicronemia e
hipertigliceridemia)
Extensión de la
dispersión de la luz
(scattering) por
quilomicrones y VLDL
Elevación artificial de la
absorbancia y sobre
estimación de
concentración.
Uso de muestras en
ayuno exacto; técnicas
de reemplazo de
plasma por solución
salina en casos críticos.
Ictericia
(Hiperbilirrubinemia)
Solapamiento de los
espectros de
absorción de la
bilirrubina a longitudes
de frecuencia
cercanas.
Transformación
variable de las lecturas
ópticas según el
reactivo utilizado.
Concentración de
corrección
espectrofotométrica
matemática a
múltiples longitudes
de frecuencia.
Falta de Calibración /
Deriva Instrumental.
Desalineación de
monocromadores o
deterioro de la fuente
luminosa.
Sesgo analítico
sistemático en las
medidas.
Implementación de los
programas de Control
de Calidad Interno
(CCI) y Evaluación
Externa de la Calidad
(EQA).

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En la tabla 2 podemos corroborar dónde se originan los errores preanalíticos primordiales
que llegan a perjudicar la precisión de las medidas fotométricas. La hemolisis in vitro e in
vivo por otra parte podría causar un impacto en los resultados exigiendo la verificación
estricta del índice hemolítico, altera la línea base espectral causada por la presencia de
hemoglobina libre (Sánchez & Pérez , 2017). De la misma manera la turbidez provocada por
la lipemia origina dispersión de la luz (scattering), lo que en muchas ocasiones da resultados
erróneos que en situaciones críticas se deben utilizar técnicas de reemplazo o blanco de
muestras. (Ramírez & Torres, 2019). Por último, la presencia de sesgos en la curva de
calibración y la ictericia simbolizan retos analíticos que pueden manejarse con estándares de
control de calidad interno y externo para ser corregidos con mecanismos ópticos (Martínez
& López , 2020).
DISCUSIÓN
Los hallazgos de esta revisión confirman que la espectrofotometría continúa siendo el pilar
analítico indiscutible para la determinación cuantitativa de hemoglobina en la práctica
biomédica. No obstante, el análisis de la literatura refleja un cambio de paradigma
caracterizado por el reemplazo progresivo de las técnicas manuales clásicas en favor de
plataformas automatizadas y tecnologías Point-of-Care. (Villalva & Mendoza, 2020).
Al comparar las técnicas tradicionales con los métodos automatizados los resultados que
conseguimos respaldan las observaciones de Fernández y Martínez (Fernández & Martínez,
2021), quienes sostienen que el cambio de reactivos a base de cianuro por laurilsulfato de
sodio (SLS) no solo suprime a aquella generación de residuos tóxicos, pues más bien mejora
las cifras de variación (CV < 1.5%) en el día a día. Sin embargo, en las muestras considerables
con lipemia o con hiperbilirrubinemia marcada, la automatización sola no puede neutralizar
en su totalidad la dispersión de la luz. En estos casos, concuerda lo planteado por Gómez y

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colaboradores (Gómez et al., 2022).
Acerca de las tecnologías emergentes no invasivas (NIR), los datos que fueron analizados
coinciden con las investigaciones de Patel et al. (Patel, Smith, & Taylor, 2020) y López-Ríos
(Lopez-Ríos, 2023), son los que destacan la utilidad clínica en neonatología y unidades de
cuidados intensivos al impedir microtraumas vasculares y flebotomías repetitivas. No
obstante, como señalan Rodríguez y Tan (Rodríguez et al., 2021), el fallo de estandarización
referente al método de referencial de la International Council for Standardization in
Haematology (ICSH) no permite por el momento el uso del mismo como prueba
confirmatoria, relegándola la utilidad de tamizaje.
En conclusión, la implementación implacable de programas de Evaluación Externa de la
Calidad (EQA), como proponen Silva y Morales (Silva et al., 2022), forman parte de la
estrategia más segura que puede mitigar los errores sistemáticos e interinstrumentales en
lo que a laboratorios se refiere.
CONCLUSIONES
El cambio que generó la espectrofotometría aplicada con respecto a la determinación de
hemoglobina demuestra el importante avance desde el método manual de
cianmetahemoglobina llevado a la automatización. Este cambio se dio al dejar a atrás
reactivos tóxicos y a su vez disminuir errores operativos en el laboratorio clínico.
Las interferencias causadas por la lipemia, la ictericia y hemólisis siguen siendo las causas
principales que complican el buen resultado en las lecturas fotométricas. Pero insertar la
verificación sistemática de los índices séricos, han resultado necesarios para tratar de
contrarrestar dichos efectos y evitar errores en la interpretación del perfil hematológico.
En cuanto a metodologías no invasivas basadas en espectroscopía de infrarrojo cercano (NIR)
ellas son claramente una innovación competente que sin duda ayudará a la monitorización